Autoradiografia - zasada działania i zastosowanie

Autoradiografia stanowi metodę wykrywania izotopów promieniotwórczych przy użyciu emulsji fotograficznej. Pod wpływem promieniowania jonizującego przenikającego ze znakowanego materiału biologicznego do emulsji powstaje w niej utajony, który po zastosowaniu procedury fotograficznej ujawnia się w postaci ziaren widocznych pod mikroskopem. Zatem do sporządzenia autoradiogramu potrzebne są trzy elementy:
- Emulsja jądrowa
- Izotopy promieniotwórcze
- Materiał biologiczny

•Emulsja składa się z ziaren AgBr (kryształów) zawieszonych w żelatynie. W skład kryształów AgBr wchodzą jony Ag+ i Br - oraz srebro metaliczne, tworzące tzw. ogniska czułości.
•Cząstki przenikające przez kryształ pozostawiają na drodze swego przebiegu wolne elektrony.
•Elektrony skupiają się w obrębie ognisk czułości – powstają ujemne ładunki
•Do miejsc tych dążą kationy ulegające neutralizacji.
•Powstaje obraz utajony
•Kryształy z obrazami utajonymi ulegają szybciej redukcji w trakcie wywoływania.
Wydajność autoradiogramu
•Określa ją ilość powstających emulsji pod wpływem jednego rozpadu jądra atomowego w źródle promieniowania.

Wydajność zależy od :
- rodzaju izotopu
- grubości materiału biologicznego
- emulsji
- czasu ekspozycji
- procedury technicznej

Rodzaje autoradiografii
-Metoda filmu zdzieranego
- Metoda emulsji płynnej
- Autoradiografia śladowa
- Autoradiografia mikroskopowo – elektronowa
- Autoradiografia związków rozpuszczalnych

Proces fotograficzny
•Polega na wywoływaniu i utrwalaniu obrazu utajonego .
•Jest to redukcja kryształu AgBr do Ag przez chemiczne związki w środowisku zasadowym.
•Pod mikroskopem widać powstałe ziarna srebra metalicznego
•Szybkość wywołania zależy od obecności obrazów utajonych, srebro pełni rolę katalizatora.
•Najczęściej używanym wywoływaczem w ARG mikroskopu świetlnego jest D19b Kodaka.
•Utrwalanie polega na wypłukiwaniu tych kryształów , które nie tworzą obrazów utajonych i powstawaniu kompleksów w wodzie.
•Utrwalacz: tiosiarczan sodu.